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生化培養箱應用于濾膜和多管發酵實驗
發布時間:2017-10-25   點擊次數:1189次

    生化培養箱廣泛應用于多個領域,各科研單位會利用生化培養箱做各種實驗,下面我們就來介紹下怎樣用生化培養箱做多管發酵法與濾膜法實驗。

    1.濾膜法
    生化培養箱濾膜是一種微孔性濾膜,孔徑0.45μm。將水樣注入已滅菌的放有濾膜的過濾器中,經過抽濾,細菌即被截留在膜上,然后將濾膜貼于M-FC培養基上,在44.5℃±0.5℃下培養24 h±2h。糞大腸菌群菌落在M-FC培養基上呈藍色或藍綠色,其他非糞大腸菌群菌落成灰色、淡黃色或無色。正常情況下,由于溫度和玫瑰酸鹽試劑的選擇性作用,在M-FC培養基上很少見到非糞大腸菌菌落。

    2.多管發酵法

    初發酵實驗

    生化培養箱發酵管內裝有單倍或三倍乳糖蛋白胨培養液,并在內倒置有小玻璃管。每個樣品用三個不同的水樣量接種,同一接種水樣量要有五管,將水樣分別接種到裝有乳糖蛋白胨培養液的 生化培養箱發酵管中,在37℃±0.5℃下培養24h±2h。乳糖能起選擇作用,因為很多細菌不能發酵乳糖,而大腸菌群能發酵乳糖并產酸產氣。培養液中加入溴甲酚紫作為酸度指示劑,細菌產酸后,培養液即由原來的紫色變成黃色。產酸產氣的發酵管表明試驗陽性,如在倒管內產氣不明顯,可輕拍發酵管,有小氣泡升起為陽性。

    復發酵實驗

    輕微振蕩初發酵試驗陽性結果的 生化培養箱發酵管,用3mm接種環將培養物(2-3環)轉接到EC培養液中,在44.5℃±0.5℃下培養24h±2h(提高培養溫度可造成不利于來自自然環境的大腸菌群的生長)。培養后立即觀察,發酵管產氣則證實為糞大腸菌群陽性。

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