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乳糖發酵實驗
發布時間:2018-12-28   點擊次數:44次

使用恒溫培養箱進行乳糖發酵實驗

乳糖發酵( Lactose Fermentation Experiment ) 是常用的鑒別微生物的生化反應,在腸道細菌的鑒定上尤為重要,是初步鑒定腸道致病菌與非致病菌常用的試驗。應用于食品,環境行業比較多.下面小編給大家介紹一下乳糖檢測的實驗方法,供大家參考

一、乳糖發酵實驗

1、取10ml水樣接種到10ml雙料乳糖蛋白胨培養液中,取1ml水樣接種到10ml單料乳糖蛋白胨培養液中,另取1ml水樣注入到9ml滅菌生理鹽水中,混勻后吸取1ml(即0.1ml水樣)注入到10ml單料乳糖蛋白胨培養液中,每一稀釋度接種5管。對已處理過的出廠自來水,需經常檢驗或每天檢驗一次的,可直接種5份10ml水樣雙料培養基,每份接種10ml水樣。

2、檢驗水源水時,如污染較嚴重,應加大稀釋度,可接種1,0.1,0.01ml甚至0.1,0.01,0.001ml,每個稀釋度接種5管,每個水樣共15管。接種1ml以下水樣時必須作10倍遞增稀釋后,取1ml接種,每遞增稀釋一次,換用1支1ml滅菌刻度吸管。

3、將接種管置36±10℃恒溫培養箱內,培養24h±2h,如所有乳糖蛋白胨培養管都不產氣產酸,則可報告為總大腸菌群陰性,如有產酸產氣者,則按下列步驟進行。

二、分離培養:經培養24h后,將產酸產氣的發酵管,分別接種于伊紅美藍平板上,36±10℃慍溫培養8h-24h,觀察形態,挑取數個可疑菌落進行涂片、革蘭氏染色、鏡檢。

三、證實試驗:挑取可疑管接種乳糖蛋白胨培養液中,置于36±10℃恒溫培養箱中培養24h±2h,有產酸產氣者,即證實有總大腸菌群存在。

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