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粗脂肪的提取和定量測定
發布時間:2018-09-26   點擊次數:362次

 喆圖小編就來說說用索氏提取法測定粗脂肪含量的原理及操作,熟悉重量分析的基本步驟。

    實驗原理 :脂肪是丙三醇(甘油)和脂肪酸結合成的脂類化合物,能溶于脂溶性有機溶劑。  

    本實驗利用脂肪能溶于脂溶性溶劑這一特性,用脂溶性溶劑將脂肪提取出來,借蒸發除去溶劑后稱量。整個提取過程均在索氏提取器中進行,通常使用的脂溶性溶劑為億醚,或沸點為30℃~60℃的石油醚。用此法提取的脂溶性物質除脂肪外,還有游離脂肪酸、磷酸、固醇、芳香油及某些色素等,故稱為“粗脂肪”。同時,樣品中結合狀態的脂類(主要是脂蛋白)不能直接提取出來,所以該法又稱為游離脂類定量測定法。  索氏抽提法測定脂肪最大的不足是耗時過長,如能將樣品先回流1~2次,然后浸泡在溶劑中過夜;次日再繼續抽提,則可明顯提高提取率。

    接下來喆圖小編就來說說實驗操作前的一些準備工作及步驟:

    將電熱恒溫水浴鍋的水溫事先加熱(80℃)。務必保證提取管和燒瓶內干燥、潔凈;若否,將其洗凈并置于鼓風干燥箱內120℃烘干。

    1.折濾紙斗,取一張?11cm的濾紙,折成筒狀,再將其一端折起來封死,便做成了濾紙斗。 

    2.稱樣:先將數粒花生仁去皮,在碾缽中用碾錘徹底搗碎作為實驗樣品。將濾紙斗在電子天平上稱重,然后用藥勺取2勺(約2g)樣品裝入濾紙斗中,把濾紙斗的開口處折起來封死;防止樣品泄出濾紙斗。調整濾紙斗的高度,使其放在抽提管中時略低于虹吸管的上彎頭處。將裝好樣品的濾紙斗放在電子天平上稱重,兩質量之差即為樣品的質量。 

    3.提取:將索氏提取儀,從下至上安裝。首先安裝好燒瓶,并調整其高度,使其剛好能浸入電熱恒溫水浴鍋中的水中。將裝置從水浴鍋的水中取出,繼續安裝提取管,把裝有樣品的濾紙斗放入提取管內,向提取管中緩緩倒入石油醚直至液面達到虹吸管上彎頭部,正好虹吸一次;再向提取管中倒入石油醚,使其液面達到第一次液面的一半。用乳膠管將冷凝管與自來水管相連,將冷凝管安裝到提取管上,檢查一下,確保所有接口均對接完好(不漏氣,不打滑)。輕輕打開自來水(冷凝用),將索氏提取儀整個裝置放入電熱恒溫水浴鍋中加熱提取(水溫80℃左右)。提取時間2~4h,約虹吸20次以上,記錄每次虹吸所需的時間和虹吸次數。附注:若要將樣品的粗脂提取完全,提取時間至少為12h以上。由于實驗時間的限制,我們的提取率只能達到80%左右。  

    4.回收石油醚:提取2h后,當石油醚在提取管中的液面即將達到虹吸管的上彎頭處時,從電熱恒溫水浴鍋中取出索氏提取儀裝置,室溫冷卻5~10min;取下平底燒瓶,將提取管的下端口插入回收瓶中,傾斜裝置,提取管中的石油醚會虹吸而流入回收瓶中,達到回收的目的。再裝上平底燒瓶,繼續放入電熱恒溫水浴鍋中加熱直至冷凝管下端無石油醚滴下,表明平底燒瓶中的石油醚已經蒸干。注意:必須蒸干后才能放入鼓風干燥箱烘干,否則會引起火災。取下平底燒瓶,回收提取管中的石油醚。  

    5.稱量粗脂質量:將平底燒瓶放入120℃的鼓風干燥箱中烘15min,取出冷卻后稱重(須戴手套,以免燙傷)。再將平底燒瓶用洗滌劑洗凈,于120℃的鼓風干燥箱中烘干(約15min),取出冷卻后稱重,兩者的質量之差就是粗脂的質量。  

   清潔 

   從提取管中取出濾紙斗,清洗提取管,整理好桌面上的儀器和試劑,并注意清潔自己的操作臺。  

   計算 

   樣品粗脂的含量(%)=(粗脂的質量/樣品的質量)*100%

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